通过DEAE-SephadexA-50,DEAE-SepharoseCL-6B,MonoQ(FPLC)三步离子交换柱层析,纯化得到一新的纤维蛋白原溶酶,在碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上均呈单一的蛋白带。分子量为26000,等电点pI4.7;它是一个糖蛋白,含糖量6.4％,其中中性糖0.3％,己糖胺4.9％,唾液酸1.2％。烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶TMVFg由187个氨基酸组成,含有较高的酸性氨基酸,此外甘氨酸含量也较高。TMVFg热稳定性强,而酸不稳定,在280nm处具有典型的蛋白吸收峰,在无离子水中紫外消光系数E0.1％/280nm=1.558。纯化的TMVFS具有较强的精氨酸酯酶活力,对苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)的Km值为1.4×10^(-3)M。TMVFS的活性受苯甲基丹磺酰氟(PMSF)抑制,乙二胺四乙酸(EDTA)对活性无影响。TMVFg不能使纤维蛋白原凝固,但能水解纤维蛋白原α、β链。纤溶实验表明TMVFg具有激活纤溶作用。纯化的烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶对酪蛋白无作用,无出血活性,因而与凝血酶样酶、出血毒素及纤维蛋白原溶酶(OUYANG et al,1977) 明显不同。
展开▼
