脂多糖对新生儿脐血单个核细胞产生IL-6及IL-6mRNA表达水平的影响

摘要

【目的】　通过观察LPS对新生儿脐血单个核细胞 (MNC)分泌IL 6及表达IL 6mRNA基因的影响 ,探讨严重细菌感染时新生儿机体防御反应机制。　【方法】　取细胞浓度为 1× 1 0 6个 /ml的脐血MNC悬液按每孔 0 .9ml置入 2 4孔培养板 ,每八孔为 1组 ,共 6组 ,按倍比稀释法各组加入不同浓度LPS培养 36小时。同法另设 6组各加同一浓度LPS(1 μg/ml)培养不同时间 ,再设 6组不加LPS者按相应时间培养作为对照组。样本处理完毕后收集上清液及细胞分别用ELISA和RT PCR方法测定IL 6及IL 6mRNA表达情况。　【结果】　脐血MNC在PLS刺激 3、6、1 2、1 8、2 4、36小时后IL 6分泌水平逐步增高 ,6小时以后增加尤为明显 ,与其他各时间点比较差异非常显著 (P <0 .0 0 1 )。LPS刺激组与对照组相同时间点比较 ,6小时内IL 6变化水平无差异 ,6小时以上各点差异有显著性 (P <0 .0 1 )。RT PCR方法检测显示LPS刺激后 3小时即可见IL 6mRNA基因表达。脐血MNC受不同浓度LPS刺激时 ,IL 6分泌水平随LPS浓度递增。全部脐血MNC均检测到IL 6mRNA基因表达。　【结论】　LPS能诱导新生儿脐血MNCIL 6mRNA基因转录 ,从而促使IL 6合成、分泌 ,该作用呈时间。