变铅青链霉菌TK24 secE启动子表达特性的研究

摘要

通过PCR扩增得到变铅青链霉菌 (Streptomyceslividans)TK2 4secE基因上游 4 96bp的片段 ,其序列与S .coelicolorsecE启动子序列同源性为 99 8%。将该序列克隆到以儿茶酚加氧酶基因 (xylE)为报告基因的链霉菌启动子探测质粒pIJ4 0 83上 ,并转化S .lividansTK2 4原生质体 ,获得了重组菌株S .lividans[pIJ4 0 83 secE]。S .lividans[pIJ4 0 83 secE]菌株发酵结果表明 ,secE启动子为强启动子 ,活性与vsi基因启动子相当。secE启动子的表达在对数生长期达到高峰 ,平台期下降 ;2 8℃发酵培养时secE启动子活性远高于 37℃发酵培养 ;比较了不同发酵培养基Phage ,NB和CM中secE启动子的活性 ;实验结果还表明培养基中葡萄糖含量对secE启动子的表达有抑制作用。