虫草素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对端粒酶活性影响的研究

摘要

目的:研究虫草素(Cordycepin)对人肝癌细胞HepG-2诱导凋亡作用及对端粒酶活性的影响。方法:虫草素处理人肝癌HepG-2细胞株后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应;倒置相差显微镜下观察肝癌细胞形态变化;用透射电镜观察超微结构的变化及荧光显微镜观察细胞凋亡效应;应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化及凋亡率;免疫组化方法测定NF-κBp65的表达;用TRAP-PCR-银染法对肝癌细胞端粒酶活性进行检测。结果:不同浓度的虫草素对HepG-2有明显抑制作用,P=0.002,且呈剂量依赖性;形态学观察也发现,大量细胞的染色质边集、凝聚、核碎裂及凋亡小体产生;免疫组化示,NF-κBp65的表达下调,P=0.0001;FCM检测结果显示虫草素作用后,使细胞阻滞于S期,P=0.0001,并出现典型的"亚二倍体"凋亡峰,同时伴随端粒酶活性下调,P=0.0001。结论:虫草素对人肝癌细胞具有明显抑制作用,其诱导细胞凋亡的机制可能与下调NF-κB的表达并抑制端粒酶活性有关;虫草素与5-FU联合对肝癌细胞无明显协同抑制作用。