壳聚糖和磷脂化壳聚糖涂层膜对血管内皮细胞生长和血液相容性的影响

摘要

目的:观察聚合物壳聚糖(chitosan,CHI)和磷脂化壳聚糖(phosphorylcholinechitosan,PC-CHI)涂层膜对培养的血管内皮细胞增殖和迁移及血液相容性的影响。方法:将CHI和PC-CHI均匀喷涂在培养皿底层制成聚合物膜,以316L不锈钢片做成不锈钢圆柱体槽,将猪髂动脉内皮细胞接种于聚合物膜、不锈钢槽和不做任何处理的培养皿底部(空白对照组),培养24h。光镜和扫描电镜观察细胞形态,以CCK-8试剂盒测定细胞增殖,并进行细胞迁移检测。以凝固法测定健康人血液在聚合物膜上作用2h后的凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原测定(FiB)和凝血酶时间(TT)。结果:动脉内皮细胞在CHI和PC-CHI膜上生长良好,形态正常。培养24h,内皮细胞在CHI和PC-CHI膜上的增殖率分别达88.8%和77.8%,存活内皮细胞数目较不锈钢片组显著增加(P<0.01);而CHI组的存活内皮细胞数目显著高于PC-CHI组(P<0.01)。培养72h,内皮细胞在CHI和PC-CHI膜上迁移细胞数均显著高于316L不锈钢片,PC-CHI组较CHI组的细胞迁移数目显著增加(P<0.01)。PC-CHI组、316L不锈钢片组和空白对照组的APTT较CHI组显著延长(P<0.05,P<0.01),FiB显著增加(P<0.01)。各组间PT和TT均无明显差异。结论:CHI和PC-CHI涂层膜有助于血管内皮细胞的增殖和迁移,对内皮细胞的相容性良好。PC-CHI较CHI有显著抗血栓形成作用。