大黄素对糖尿病肾病小鼠AMPKα1/TLR4/p65信号通路的影响

摘要

目的观察大黄素(Emodin)对糖尿病肾病(DN)模型小鼠AMPKα1/TLR4/p65信号通路的影响。方法采用SPF级雄性KK-Ay小鼠,经高脂饲料诱导3周建立DN模型,将30只模型成功KK-Ay小鼠随机分为模型组,阳性药组,大黄素高、中、低剂量组,每组6只,另将6只雄性C57BL/6J小鼠设为正常组,分组后大黄素低剂量组由于操作失误导致1只小鼠死亡。正常组及模型组予去离子水10 ml/(kg·d),阳性药组予缬沙坦13.33 mg/(kg·d),大黄素各组分别予大黄素13.33 mg/(kg·d)、6.67 mg/(kg·d)、3.33 mg/(kg·d)灌胃。各组小鼠每日灌胃1次,连续干预治疗12周,留取血清及肾组织标本。以RT-PCR技术检测肾组织AMPKα1、TLR4、p65、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)mRNA转录水平;Western blot技术及免疫组化技术检测肾组织AMPKα1、p65蛋白表达水平;ELISA技术检测血清中IL-6、IL-18的表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平明显下降(P<0.01);TLR4 mRNA表达水平明显上升(P<0.01);p65、IL-6、IL-18 mRNA转录及蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,各用药组AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调(P<0.01,P<0.05);各用药组TLR4、p65、IL-6、IL-18mRNA及蛋白转录水平显著下调(P<0.01,P<0.05)。结论大黄素降低IL-6、IL-18等促炎因子表达,减轻DN免疫炎性损伤作用可能与上调AMPKα1活性,抑制TLR4/p65信号通路,减少下游炎症因子释放有关。