间接免疫荧光法在检测SARS冠状病毒特异性抗体中的应用

摘要

目的　利用间接免疫荧光技术 (IFA)建立SARS冠状病毒 (SARS -CoV)特异性抗体血清学诊断方法。方法　采用组织培养技术 ,用SARS病人的咽漱液样本 ,在Vero-E6细胞中培养 ,分离SARS冠状病毒 ;用已制备的SARS病毒抗原片与临床确诊为SARS的病人双相血清和正常人对照血清作用 ,再用荧光标记羊抗人IgM/IgG抗体与之结合 ,在荧光显微镜下观察荧光图像。结果　通过建立检测SARS冠状病毒特异性抗体的间接免疫荧光方法 ,在 4 4份SARS临床病例标本中 ,检出IgG抗体阳性 31份 ,与临床诊断符合率为 70 .4 5 %。 31份IgG阳性者的急性期血清中IgM检出率为 38.70 % ,IgM最早产生于发病第 3天 ,发病 7d以上的 6例的IgM抗体均为阳性 ,滴度在发病 1 2～ 1 5d达到高峰 (1∶80 ) ;恢复期血清中IgG抗体最早产生于发病第 8天 ,滴度在发病 1 5～ 2 0d达到高峰 (1∶32 0～ 1∶6 4 0 )。 97份正常人的血清标本中IgG抗体阳性率为 3 0 9% ,IgM抗体为阴性。结论　利用此方法 ,证实被SARS冠状病毒感染后 ,在机体中产生有特异性的IgM/IgG抗体 ;本方法检测结果与临床诊断符合率较高 。