人组织因子途径抑制因子基因转染对移植静脉新生内膜的影响

摘要

目的为减少冠状动脉旁路移植术后移植静脉再狭窄,探讨人组织因子途径抑制因子(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因转染对移植静脉内膜增生的影响。方法构建真核表达质粒pCMV-(Kozak)TFPI。将48只日本大耳白兔随机分为3组,每组16只,即TFPI转染组、空载体对照组和空白对照组。建立颈总动脉旁路移植模型。吻合前,TFPI转染组移植静脉内采用阳离子脂质体pCMV-(Kozak)TFPI(400μg)和腔内加压灌注法(30min)转染,空载体对照组以空质粒pCMV(400μg)代替pCMV-(Kozak)TFPI,空白对照组不予干预。术后3d,用RT-PCR、Western-blot和免疫组织化学法检测外源基因在移植静脉中的表达。术后30d,血管多普勒测量移植静脉管腔内径和管壁厚度;组织病理标本测量内膜面积和中膜面积,并计算其比值;透射电镜观察移植静脉新生内膜的细胞构成。结果TFPI转染组移植静脉中有人TFPI基因mRNA和蛋白表达,两对照组未见表达。TFPI转染组移植静脉管腔内径为(2.68±0.32) mm,大于空载体对照组(2.41±0.23)mm和空白对照组(2.38±0.21)mm,差异均有统计学意义(P0.05)。透射电镜观察,TFPI转染组移植静脉内膜未见平滑肌细胞,两对照组均见平滑肌细胞。结论人TFPI基因转染减少移植静脉内膜增生。