褪黑素对异氟烷诱导的发育神经元凋亡及细胞色素C和半胱氨酸蛋白酶-3释放的影响

摘要

目的探讨褪黑素(MT)对全身麻醉药诱导发育神经元凋亡的改善作用及可能的作用机制。方法出生后7日龄(P7)Sprague-Dawley幼鼠40只,分入异氟烷组(予异氟烷吸入麻醉,吸入体积分数为0.013)、异氟烷低剂量MT组(异氟烷麻醉前15min予幼鼠腹腔内注射MT5mg/kg,麻醉2h后重复注射1次同剂量MT)、异氟烷高剂量MT组(两次注射MT的剂量为20mg/kg)和空白组(吸入空气,持续3h),每组10只。观察麻醉结束后各组幼鼠大脑海马CA1区神经元细胞色素C(Cyt-C)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的免疫组织化学染色结果,并计算终端dUTP末端标记法(TUNEL)测定的凋亡指数(AI)。结果空白组幼鼠海马CA1区神经元细胞质基本未见Cyt-C和Caspase-3阳性染色,神经元存在少量点状凋亡。异氟烷组Cyt-C和Caspase-3阳性染色明显增加,凋亡神经元数目明显增多,Cyt-C和Caspase-3光密度值、AI均显著高于空白组(P值均0.05)。结论 MT对全身麻醉药诱导的发育神经元凋亡具有改善作用,其作用机制可能与抑制线粒体途径中Cyt-C的胞质释放,减少下游Caspase-3的活化,进而减少发育神经元的异常凋亡有关。