副猪嗜血杆菌抗原抗体复合物疫苗对小鼠免疫保护效果的评价

摘要

为评价副猪嗜血杆菌标准血清5型菌株(HPS-5)抗原抗体复合物疫苗对小鼠的免疫保护效果,选用40只ICR小鼠,随机分为5组(每组8只),分别设为灭活疫苗组、抗原抗体复合物疫苗组、阴性对照组、攻毒对照组和空白组。将制备的疫苗接种小鼠,在首次免疫前、首次免疫2周后、二次免疫2周后分别采集小鼠血清通过间接ELISA方法检测抗体水平。二次免疫2周后,每组随机取3只小鼠分离外周血淋巴细胞并提取总RNA进行反转录,通过SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测小鼠细胞因子水平。随后,用HPS-5攻毒,观察7 d,计算免疫保护率。取每组小鼠的肺和脾,制作病理切片后置于显微镜下观察。结果显示:抗原抗体复合物疫苗组刺激小鼠产生的TNF-α、IL-6、IFN-γ细胞因子水平与灭活疫苗组、阴性对照组相当(P>0.05),IL-10细胞因子水平显著低于这两组(P<0.05)。抗原抗体复合物疫苗组的D_(450,IgG2a)/D_(450,IgG1)值(0.76)显著高于灭活疫苗组(0.54)和阴性对照组(0.55)(P<0.01)。灭活疫苗组与抗原抗体复合物疫苗组小鼠的存活率均为60%,病理切片结果显示,抗原抗体复合物疫苗组对肺、脾的保护作用略优于灭活疫苗组。以上结果提示,制备的抗原抗体复合物疫苗可能通过下调Th2型反应从而维持Th1/Th2型免疫反应平衡,同时可以降低小鼠机体的炎性反应,具有较好的免疫保护效果,为研究抗原抗体复合物疫苗预防副猪嗜血杆菌感染奠定了理论基础。