大葱雄性不育分子标记辅助选择的研究

摘要

大葱雄性不育在杂种优势利用中具有重要价值 ,传统方法选育不育系效率低 ,分子标记辅助育种可提高育种效率。本研究试图建立大葱雄性不育辅助育种的技术体系 ,加快大葱不育系、保持系的育种进程。利用RAPD技术分析了多态性片段S132 80 0 、S3896 0 、S72 30 0 、S73110 0 、S2 0 0 2 4 0 0 与大葱育性的连锁关系 ,重组率分别为 0、 7 5 %、 0、 4 2 %、 0。其中S132 80 0 、S2 0 0 2 4 0 0 能在多数品种中区分N、S胞质 ,且重组率接近 0 ,用于胞质鉴定具有很高的准确率 ,因而具有较高的利用价值。以S132 80 0 、S2 0 0 2 4 0 0 为探针对不育系和保持系mtDNA的酶切片段进行了Southern杂交分析 ,结果表明它们在N、S胞质中存在多态性 ,预示着它们可能是与大葱CMS相关的片段。鉴于RAPD标记的应用有一定局限性 ,进一步对特异片段S132 80 0 、S2 0 0 2 4 0 0 进行了克隆、测序和SCAR标记转化 ,其中S132 80 0 成功转化为SCAR标记 ,而S2 0 0 2 4 0 0 转化后多态性消失。为进一步降低成本 ,简化了SCAR扩增产物的检测技术 ,初步建立了大葱不育系、保持系分子标记辅助选择的技术体系。研究表明 ,SCAR产物加入EB直接检测存在一定误差 ,而通过快速电泳可以快速、准确地鉴定单株的胞质类型。RAPD标记和SCAR标记在育种?