抗斯氏按蚊中肠蛋白组分的抗体对约氏疟原虫卵囊的作用

摘要

目的观察抗斯氏按蚊中肠蛋白组分的抗体对约氏疟原虫卵囊的抑制作用。方法解剖实验室饲养斯氏按蚊雌蚊,取中肠(胃)制备中肠蛋白抗原并免疫BALB/c小鼠(8只,100μg/只),共免疫4次,每次间隔7～10d,末次免疫后10d,腋窝动脉取血,分离血清。用蛋白质印迹(Westernblotting)分析中肠蛋白的免疫活性抗原。用葡聚糖凝胶过滤法获得相对分子质量(Mr)为38000～50000的蛋白。用该中肠蛋白免疫小鼠(12只,100μg/只),共免疫4次,每次间隔7～10d。同时设PBS对照组。末次免疫后7d,ELISA检测小鼠血清中的抗体,抗体效价≥1:2560时,该免疫组小鼠和对照组小鼠经腹腔接种感染约氏疟原虫(约含2×107个感染疟原虫的红细胞),感染后3d取小鼠尾血镜检,雌配子体数>2/10个视野的小鼠作为供血鼠,斯氏按蚊成蚊吸血后9d解剖,计数中肠的卵囊数量。结果West-ernblotting显示斯氏按蚊中肠蛋白抗原的显色区带有8条,其中Mr38000～50000的区带显色较清晰;实验组和对照组中肠卵囊感染率分别为28.70%(62/216)和51.09%(47/92)(P<0.05),中肠卵囊指数分别为14.14(1541/109)和26.02(1223/47),两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论斯氏按蚊Mr38000～50000中肠蛋白有免疫活性;针对该中肠蛋白的抗体对约氏疟原虫卵囊的发育有明显的抑制作用。