U1RNP70KD,Sm-D,SSB及β2GP1自身抗原的重组表达及临床研究

摘要

目的　制备U1RNP70KD ,Sm D ,SSB及 β2GP1重组自身抗原 ,探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测的敏感性和特异性。方法　应用逆转录PCR方法克隆 β2GP1及其第 5功能区 (D5 ) ,U1RNP70KD及其U1RNA结合功能区 (BD) ,Sm D和SSB的编码基因 ,经原核表达系统 (PGEX 2T)进行表达、鉴定及纯化 ,并分析 β2GP1及U1RNP70KD抗原表位的定位 ,进而以重组抗原为基质建立新型免疫印迹及酶联免疫吸附检测法。结果　成功表达纯化了上述重组抗原 ;定位研究显示 β2GP1 D5及U1RNA BD分别为 β2GP1及U1RNP70KD的主要抗原表位区域 ;新型重组检测法的测定结果与常规检测系统比较基本相吻合。结论　重组蛋白具有良好的特异性 ,可进一步作为抗原表位研究的手段 ,并可用于临床自身抗体检测。