鼠TRAM蛋白B细胞表位预测及其免疫原性检测

摘要

目的预测TRAM蛋白的二级结构和B细胞表位,为抗鼠TRAM单克隆抗体制备奠定基础.方法以TRAM蛋白的氨基酸序列为基础,采用Goldkeu计算机分析软件以及网络nnpredict二级结构分析软件对TRAM蛋白二级结构及B细胞表位预测.合成针对该表位的多肽,以此多肽为免疫原免疫兔,对其免疫原性进行检测.结果用多参数预测TRAM蛋白的二级结构和B细胞表位,综合评判表明:TRAM分子的第216～229位氨基酸满足亲水性、可及性和可塑性,在二级结构上位于蛋白伸展结构或无规则卷曲结构内,最可能为其优势B细胞表位.此多肽能诱导机体产生较高的抗体滴度,多克隆抗体具有高的特异性.结论 TRAM分子的第216～229位氨基酸为其优势B细胞表位,这为制作B细胞优势短肽单克隆抗体提供了理论依据.