人参三七川芎提取物延缓血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞衰老机制的研究

摘要

目的探讨人参三七川芎提取物对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响。方法体外培养的HUVECs加入终浓度为10-6mol/LAngⅡ诱导细胞衰老,造成内皮细胞衰老模型。细胞分为AngⅡ衰老模型组、空白对照组、人参三七川芎高剂量组、人参三七川芎低剂量组和缬沙坦组,采用SA-β-半乳糖染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R)、NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果AngⅡ衰老模型组与空白对照组比较,β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G0-G1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox蛋白表达明显上调,AT1R表达较空白对照组上调。给予高、低剂量中药处理后改善了细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G0-G1期细胞减少,G2-M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较AngⅡ衰老模型组增加,p47phox蛋白表达下调,AT1R表达较AngⅡ衰老模型组下调。结论人参三七川芎提取物能够延缓AngⅡ诱导的HUVECs衰老,可通过AT1R下调NAD(P)H氧化酶p47phox表达,进而使ROS产生减少,可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。