蒺藜皂苷对缺氧-复氧诱导大鼠皮层神经元凋亡的影响

摘要

目的:观察蒺藜皂苷(Tribulus terrestris L.saponion,TTLS)对大鼠皮层神经元经缺氧-复氧后细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:离体培养大鼠皮层神经元,先用95%N2与5%CO2混合气体造成细胞缺氧3h,再给予95%O2与5%CO2混和气复氧12h,建立缺氧-复氧损伤的皮层神经元凋亡模型。中药组于缺氧-复氧时均加入TTLS进行干预。Annexin V-FITC/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染,流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;JC-1荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位的变化,荧光酶标仪测定神经元胞浆内caspase-3/7的活性,并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况。结果:细胞缺氧3h复氧12h后,凋亡率明显增加,线粒体膜电位显著降低,胞浆内caspase-3/7活性增多,Bax蛋白大量表达(P<0.01)。TTLS能抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低,减少caspase-3/7活性,并可降低Bax蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡的发生。结论:缺氧-复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。TTLS可降低缺氧-复氧诱导细胞凋亡的发生,其机制与维持线粒体膜电位的稳定,抑制caspase酶活性,降低Bax蛋白表达有关。