miR-150对药物代谢酶CYP3A4的调控作用

摘要

目的:观察mi R-150对药物代谢酶CYP3A4的调控作用。方法:用不同浓度游离长链脂肪酸(FFA)刺激张氏肝细胞,使之成为脂肪变性肝细胞。通过荧光定量PCR和Western blot测定CYP3A4 m RNA和蛋白表达以及mi R-150表达。生物信息学分析并构建野生型CYP3A4 3'-UTR双荧光素酶报告载体,与mi R-150模拟物共转染。另外,在张氏肝细胞和脂肪变性肝细胞中分别转染mi R-150模拟物和抑制剂,检测CYP3A4 m RNA和蛋白表达。结果:张氏肝细胞经1 mmol/L FFA诱导24 h后,与对照组相比,脂肪变性肝细胞中CYP3A4 m RNA和蛋白表达均显著下降(P<0.05),mi R-150表达上升(P<0.05)。经生物信息学分析发现CYP3A4为mi R-150的靶基因,转染质粒和mi R-150模拟物后,荧光活性下降。mi R-150模拟物可使CYP3A4 m RNA表达呈浓度梯度下降(P<0.05),也可使CYP3A4蛋白表达下降;mi R-150抑制剂使CYP3A4 m RNA表达上升(P<0.05)。结论:mi R-150可直接与CYP3A4的3'-UTR结合,进而直接调控CYP3A4的表达。