Vero毒素-1B亚基基因克隆及表达

摘要

目的:构建表达Vero毒素-1B亚基的重组质粒。方法:用PCR法扩增并用低熔点琼脂糖法回收Vero毒素-1B亚基基因,将其与质粒pGEX-4T-2重组,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒。将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析。结果:获得了克隆有Vero毒素-1B亚基基因的重组质粒,经诱导后表达分子量为34 kDa的新蛋白。结论:重组质粒pVT1B的构建和表达成功说明克隆的Vero毒素-1B亚基基因具有完整的阅读框架,使简便获得Vero毒素-1B亚基成为可能,为以后研究新型的肠出血性大肠杆菌疫苗及治疗用药奠定了基础。