迟缓爱德华菌溶血相关基因的测序和初步的功能分析

摘要

溶血素是迟缓爱德华菌 (Edwardsiellatarda简称ET)的重要致病因子。用鸟枪法从ET 1 2菌的染色体中克隆到 1株含有溶血活性的克隆子 ,经测定其序列的大小为 42 64bp ,和已报道的ET两种溶血素基因无同源性 ,其中开放阅读框 3(ORF3) 42 4bp序列和伤寒沙门氏菌溶血调控基因 (slyA)序列有 68%同源性。含有完整的ORF3的亚克隆子有溶血性 ,而卡那霉素基因插入ORF3内的酶切位点 ,其转化子无溶血性。斑点杂交和Southernblot证实 ,该基因片段来源于供体菌ET 1 2 ,而且也存在于其他ET菌染色体上 ,但这些ET菌表型不一定溶血。含有溶血相关基因重组质粒的大肠杆菌 (Escherichiacoli简称E .coli)JM1 0 9、E .coliLE392有溶血现象。含有溶血相关基因重组质粒的ET菌 ,不一定有溶血现象。该基因不是溶血素结构基因 。