L-精氨酸经一氧化氮途径对人结肠癌细胞株LS174的增殖及iNOS表达和细胞周期的影响

摘要

目的探讨L-精氨酸经一氧化氮(NO)途径对人结肠癌细胞株LS174的增殖及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞周期的影响。方法LS174细胞经不同浓度L-精氨酸干预后,采用MTT法检测细胞增殖活性,硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的含量,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot和免疫细胞化学染色SP法检测iNOS蛋白的表达。结果低浓度(0.125mmol/L)的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有促进作用,高浓度(0.5、2、8及32mmol/L)的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有抑制作用;培养液中的NO浓度伴随L-精氨酸浓度的增加而升高;与对照组相比,高浓度(0.5、2、8及32mmol/L)L-精氨酸处理48h后S期细胞比例增加(P0.05);随着L-精氨酸浓度的增加,iNOS蛋白的表达较对照组有增高趋势,浓度越高,效果越明显。结论L-精氨酸通过诱导iNOS的表达,可提高NO的生成;低浓度的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有促进作用,高浓度的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有抑制作用;高浓度的L-精氨酸诱导细胞周期停滞于S期。