葫芦巴4-羟基异亮氨酸对高糖诱导小鼠3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响

摘要

目的研究葫芦巴活性成分4-羟基异亮氨酸(4-hydroxyisoleucine,4-HIL)对高糖诱导的小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)胰岛素抵抗的作用及其机制。方法以25 mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L胰岛素诱导小鼠3T3-L1脂肪细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,予以不同浓度4-HIL(5、10、20μmol/L)进行干预。采用[3H]-脱氧-D-葡萄糖摄入法检测葡萄糖摄取率,PCR法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)mRNA表达量,ELISA法检测细胞上清TNF-α蛋白水平。以棕榈酸(palmitic acid,PA)为对照。结果 25mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L胰岛素作用18 h后,3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运抑制了63%;PCR显示脂肪细胞内TNF-αmRNA的表达较正常脂肪细胞明显增高(P<0.05);ELISA显示细胞上清中的TNF-α分泌量增加70 pg/mL(P<0.05)。PA组表现出类似结果。分别加入5、10、20μmol/L 4-HIL作用24h后,3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激所产生的葡萄糖转运分别增加35%、50%、60%;PCR检测显示,脂肪细胞内TNF-αmRNA的表达随着药物浓度的增加呈递减趋势,与模型组及PA组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,药物干预后脂肪细胞培养基上清TNF-α分泌水平分别下降10、18、39 pg/mL(P<0.05)。结论 4-HIL可以显著改善高糖诱导的小鼠3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗,同时4-HIL能够抑制TNF-α的分泌。