细胞膜脂肪酸组成改变促进乳腺癌细胞凋亡的研究

摘要

目的:研究n6脂肪酸脱氢酶fat1基因在人乳腺癌细胞内的表达,改变细胞膜脂肪酸组成,对乳腺癌细胞的凋亡作用。方法:构建含有fat1基因的重组腺病毒载体(Ad.GFP.fat1),通过包装细胞系(293)产生的腺病毒,感染人乳腺癌细胞MCF7。提取细胞的总RNA,以fat1的反义mRNA作探针,用Northernblot检测fat1基因在MCF7细胞内的表达。MTT法分析fat1基因对MCF7细胞增殖的影响,凋亡染色试剂盒检测细胞的凋亡。气相色谱仪分析对MCF7细胞的n6PUFAs/n3PUFAs含量影响。结果:通过基因重组技术,得到预期的重组病毒;fat1基因在人乳腺癌细胞MCF7中能有效异源表达,2d后,可检测到fat1mRNA的条带。与对照细胞相比,fat1基因有效地抑制了MCF7细胞的增殖(23%,p<0.05),促进了凋亡(增加35%);同时降低了人乳腺癌细胞MCF7细胞膜n6PUFAs/n3PUFAs的比率。结论:腺病毒介导的fat1基因能在人乳腺癌细胞MCF7内有效异源表达,且抑制了MCF7细胞的增殖。机理为降低了细胞膜的n6PUFAs/n3PUFAs的比率。