非抗性RNAi载体及沙门氏菌递送系统的构建

摘要

为了获得一种新型、高效、安全的s iRNA片段的递送系统,应用PCR方法扩增的RNA i-R eady pS IREN-R etroQZsG reen载体中包含了U 6启动子的3.6 kb的产物,特产物与限制性内切酶B g lⅡ酶切平衡致死系统质粒PYA 3334所得的1.8 kb携带链球菌asd基因的DNA片段相连接,转化X 6212感受态细胞,通过平衡致死系统和抗性筛选得到非抗性的目的克隆。结果成功构建了非抗性RNA i载体,命名为pS IREN-A SD ZsG reen,并将此转化X 4550,最终获得稳定性的递送系统。该载体及减毒鼠伤寒沙门氏菌递送系统为今后RNA i干扰技术应用于动物病毒性疾病预防和控制的研究及转基因生物工程产品的研制打下了基础。