NOV在嗅鞘细胞中的表达及活性检测

摘要

目的　检测肾母细胞瘤过度表达基因(nephroblastomaoverexpressedgene ,nov)所编码产物(NOV蛋白)转染嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells ,OECs)后在OECs中的表达以及活性。方法　本研究用nov转染原代培养大鼠OECs ,用G418筛选,经过Westernblot检测c myc NOV的表达以及通过背根神经节(dorsalrootganglion ,DRG)与NOV转染后OECs联合培养来对表达的nov活性进行鉴定。结果　①Western blot结果显示,转染了NOVcDNA的OECs总蛋白c Myc抗体检测可见约2 8×10 3 条带,即c myc NOV融合蛋白。未转染质粒的OECs总蛋白做对照,结果为阴性,无条带出现。②与nov修饰的OECs联合培养DRG有许多DRG细胞向外迁移,细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络。未修饰的OECs组只有少量的细胞迁移和突起生长,细胞迁移和突起生长都很局限。空白对照组DRG仅有细胞迁移。结论　nov转染OECs后,并能促进与OECs联合培养的DRG细胞的迁移生长,表明产生了具有促神经细胞生长活性的蛋白。