α-硫辛酸对脂多糖诱导的大鼠胰岛细胞氧化应激和凋亡的影响

摘要

目的观察脂多糖(LPS)刺激大鼠胰岛细胞的氧化应激和凋亡情况,探讨α-硫辛酸(α-LA)对LPS诱导大鼠胰岛B细胞氧化应激和凋亡的作用。方法对照组予磷酸盐缓冲液(PBS),LPS不同质量浓度处理组(LPS 0.01组、LPS 0.1组、LPS 1组、LPS 5组、LPS 10组)分别予LPS 0.01、0.1、1、5、10μg/mL,α-LA+LPS组予α-LA 4μg/mL预处理1h后加入LPS 10μg/mL,分别刺激刚分离的大鼠胰岛。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛B细胞活力,以2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针检测胰岛氧化应激的状态,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果不同质量浓度的LPS处理大鼠胰岛24h后,仅LPS10组的光密度值显著低于对照组(P<0.05);不同LPS质量浓度处理组大鼠胰岛B细胞产生的活性氧自由(ROS)呈剂量依赖性增多(r=0.95,P<0.01),胰岛B细胞凋亡率亦呈剂量依赖性升高(r=0.87,P<0.01)。LPS 1组、LPS 5组、LPS 10组的平均荧光强度(MFI),以及LPS 5组、LPS 10组的胰岛B细胞凋亡率均显著高于对照组(P值均<0.01);而α-LA+LPS组的MFI、胰岛B细胞凋亡率均显著低于LPS 10组(P值分别<0.05、0.01)。结论一定质量浓度范围内的LPS刺激抑制胰岛B细胞活力,可诱导大鼠胰岛发生氧化应激和细胞凋亡,α-LA可以降低LPS诱导的ROS产生并抑制胰岛B细胞的凋亡。