脂肪组织特异性CREG基因敲除小鼠建立及鉴定

摘要

目的建立并鉴定脂肪组织特异性CREG基因敲除(AKO)小鼠。方法首先将CREG flox纯合子小鼠(基因型CREGfl/fl)与脂肪组织特异性Cre工具鼠[基因型Adipoq-CreTg(+)]交配。然后将获得的脂肪组织表达Cre的CREG flox杂合子小鼠[基因型CREGfl/wt:Adipoq-CreTg(+)]与CREGfl/fl小鼠交配获得子代小鼠。第4周时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)鉴定基因型,并计算不同基因型小鼠比例。采用PCR及Western Blot方法鉴定小鼠脂肪组织及心肌组织CREG转录及蛋白水平表达。结果共交配成功11只孕鼠,基因型鉴定82只子代小鼠。AKO小鼠[基因型CREGfl/fl:Adipoq-CreTg(+)]20只,CREGfl/fl小鼠22只,符合孟德尔遗传定律。AKO小鼠脂肪组织CREG转录和蛋白水平均显著低于CREGfl/fl小鼠,差异均有统计学意义(P0.05)。结论成功繁育出AKO小鼠,为深入探讨CREG在脂肪组织中的作用及机制提供了新的工具。