风疹病毒包膜糖蛋白E1酵母表达载体的构建

摘要

目的:构建风疹病毒包膜糖蛋白E1的全基因片段的克隆载体和酵母表达载体。方法:应用PCR方法扩增糖蛋白E1的全长基因,并在基因两端创建相应的酶切位点。E1基因与pBluscriptⅡSK+载体均经双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109,经氨苄筛选和蓝白斑筛选并测序,建立了克隆载体pBluscriptⅡSK+鄄E1;克隆载体与表达载体pGAPZαA双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109熏经Zeocin筛选并测序。结果:PCR扩增后出现一条1.5kb的条带,体外重组技术重组于重组质粒pBluscriptⅡSK+和pGAPZαA后,经PCR、EcoRⅠ及XbaⅠ双酶切均出现相应长度的片段,测序证实为包膜糖蛋白E1的基因。结论:成功构建了含有风疹病毒包膜糖蛋白E1全基因的克隆载体及酵母表达载体。