槲皮素拮抗内皮素1对血管平滑肌细胞L型钙通道的抑制

摘要

目的观察内皮素1(ET-1)作用下人脐动脉平滑肌细胞L型钙通道(LCC)的变化,以及槲皮素(Que)对这种变化的影响。方法原代培养第三代的人脐动脉平滑肌细胞随机分组:①空白对照组:只加入培养液;②槲皮素组:80μmol/L槲皮素培养24 h;③模型组:10 nmol/L ET-1培养24 h;④ET-1+U0126(ERK抑制剂)组:10μmol/L U0126预处理1 h,再加入10 nmol/L ET-1共培养24 h;⑤不同剂量槲皮素预处理组:分别用20、40、80μmol/L槲皮素预处理1 h,再加入10 nmol/L ET-1共培养24 h;⑥ET-1+Que+U0126组:10μmol/L U0126和80μmol/L槲皮素共同预处理1 h,再加入10 nmol/L ET-1共培养24 h;⑦ET-1+硝苯地平组:LCC通道阻滞剂硝苯地平10μmol/L预处理1 h,再加入10 nmol/L ET-1共培养24 h。选择LCC的主要亚基α1C为基因表达的观察指标,选择LCC电流(ICaL)为LCC功能的观察指标,分别检测各组细胞的α1C表达量和ICaL。结果模型组α1C的表达和ICaL密度均低于其他各组(P<0.05),空白对照组与槲皮素组的实验结果差异无显著性。结论 ET-1通过ERK通道抑制血管平滑肌细胞L型钙通道的基因表达和功能,槲皮素对ET-1有剂量依赖性的拮抗作用。