人外周血白细胞低亲和力糖皮质激素受体的检测方法

摘要

目的:研究人白细胞是否存在GRL并建立适合临床应用的检测方法。方法:回收白细胞,调白细胞浓度为(1～3)×107/ml,加入不同浓度[3H]Dex(5～5 000 nmol/L,应用加冷法;一点分析用1 000 nmol/L),共12点。非特异结合测定管再加100倍非标Dex。37℃孵育60 min。应用多头细胞收集器,通过玻璃纤维滤膜洗涤游离甾体。烘干滤膜,测定其放射强度。应用pseudo—Scatehard分析电脑程序计算出高亲和力GR(GRH)和GRL的最大结合容量(Bmax)及平衡解离常数(Kd)。