蛇毒抗高凝状态酶对人肝癌细胞及肝细胞作用的研究

摘要

目的:研究蛇毒抗高凝状态酶(antihy-percoagulabilitystateenzyme,AHCSE)对人肝癌细胞BEL-7404(简称7404细胞)、SMMC-7721细胞(简称7721细胞)和正常肝细胞LO2(简称LO2细胞)的作用以及探讨其可能的作用机制。方法:应用光学显微镜、透射电镜、MTT法、TUNEL和FCM等方法观察7404细胞、7721细胞和LO2细胞经过AHCSE处理后,细胞形态学和生物化学等方面的变化。结果:7404细胞和7721细胞经过AHCSE处理后,可见悬浮细胞较多,细胞分裂相减少;培养液内细胞碎片明显增多,胞质内部分线粒体空泡化,成簇,胞膜下多见,胞质中髓鞘样结构形成。AHCSE剂量为0·5μg/mL时对7404细胞和7721细胞具有很强的抑制作用,P值分别为0·000和0·025,但对LO2细胞无影响,P=1·000;当剂量增至75μg/mL,AHCSE对7404细胞和7721细胞抑制率上升不明显,P值分别为0·095和0·115,但是出现对LO2细胞的抑制作用,P=0·049。AHCSE作用致7404细胞和7721细胞发生凋亡具有明显的统计学意义,P值均为0·000,凋亡率随AHCSE浓度和作用时间的增加而增加,P值均为0·000。结论:AHCSE对7404细胞、7721细胞具有很强的抑制作用,对LO2细胞影响较小,AHCSE对肝癌细胞作用安全有效,除直接杀伤作用外,诱导肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一。