脂多糖上调微RNA-146a表达减缓小鼠肾脏缺血再灌注损伤

摘要

目的明确脂多糖(LPS)预处理上调微RNA(microRNA)-146a(以下简称miR-146a)表达对小鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法 120只8~10周无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠,体重20~25g,将其随机分入0.9%氯化钠溶液假手术组(NS假手术组)、LPS假手术组、抑制miR-146a+LPS预处理I/R组、LPS预处理I/R组、单纯I/R组和抑制miR-146a+I/R组,每组20只。分别于I/R后6、24和48h处死小鼠(每个时间点5只小鼠),通过实时PCR检测miR-146a在肾脏中的表达情况。I/R后24h,每组选择5只小鼠,心脏采血,分离血清,采用Quantichrom^(TM) creatinine Assay试剂盒检测血清肌酐(sCr)水平;留取各组小鼠的肾脏组织标本,进行过碘酸-雪夫(PAS)染色,采用Jablonski评分法和肾小管间质损伤评分评估肾组织的病理改变,并采用TUNEL法检测肾组织切片细胞凋亡情况。结果 LPS预处理I/R组小鼠I/R后6、24和48h肾组织中的miR-146a水平均显著高于NS假手术组、抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和抑制miR-146a+I/R组同时间点(P值均0.05);抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和单纯I/R组的肾小管间质损伤评分均显著高于LPS假手术组和LPS预处理I/R组(P值均0.05);抑制miR-146a+LPS预处理I/R组和单纯I/R组小鼠肾小管上皮细胞每高倍镜视野下的平均凋亡阳性细胞数显著多于LPS假手术组和LPS预处理I/R组(P值均<0.01)。结论 miR-146a是参与LPS诱导的肾脏I/R交叉耐受肾保护作用的重要调控分子,LPS预处理上调miR-146a表达可以显著改善I/R小鼠肾功能,减少肾小管间质损伤和肾小管上皮细胞凋亡。