人根尖乳头干细胞在羟基磷灰石和聚多巴胺-羟基磷灰石上的粘附、增殖及成骨分化

摘要

目的:提取、鉴定人根尖乳头干细胞(hSCAPs),接种于羟基磷灰石生物陶瓷(HAP)和聚多巴胺-羟基磷灰石生物陶瓷(PDA-HAP)上,对比两种支架的细胞粘附、增殖及成骨分化能力。方法:(1)改良组织块法提取hSCAPs,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原:STRO-1、CD90、CD146、CD45、CD34。(2)hSCAPs分别接种于HAP组和PDA-HAP组,DAPI和鬼笔环肽分别对细胞核和骨架染色,观察细胞形态,计数行统计分析。(3)hSCAPs分别接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、3、5、7 d,CCK8测量A值检测细胞增殖情况。(4)hSCAPs接种于HAP组和PDA-HAP组,培养1、7、14 d,检测ALP活性,Real-time PCR检测ALP、OCN和Runx2表达量。结果:(1)所提hSCAPs表达STRO-1(+)、CD90(+)、CD146(+)、CD45(-)、CD34(-)。(2)PDA-HAP组较HAP组上附着的hSCAPs数目更多(P0.05)。(4)ALP活性:诱导第1天、14天两组活性差异无统计学意义(P>0.05),但第7天PDA-HAP组明显高于HAP组(P0.05),在第7天、14天PDA-HAP组均较HAP组高(P<0.05)。结论:PDA-HAP较HAP能明显促进hSCAPs粘附、成骨相关特异基因ALP、Runx2、OCN的表达,促进hSCAPs成骨分化。