表达EB病毒主要膜蛋白gp340/220不同蛋白区段的非复制型重组痘苗病毒的构建

摘要

Epstein Barr病毒 (EBV)主要膜蛋白 gp340 / 2 2 0 ,是研究EBV亚单位疫苗的主要抗原。为了更详细地研究gp340 / 2 2 0的免疫原性 ,用PCR法获得不同区段的EBVBLLF1基因 ,并将其克隆入表达载体 pNeock1 1 β7 5中 ,通过重组质粒与非复制痘苗病毒在鸡胚成纤维细胞中同源重组 ,获得 3株表达EBVgp340 / 2 2 0不同区段的重组痘苗病毒。PCR和Southernblot结果证实 ,各个重组病毒基因组中有相应外源基因的整合。Westernblot结果表明 ,3种重组病毒感染人源细胞后都能够稳定表达蛋白 ,表达蛋白均为糖蛋白。免疫荧光结果表明 ,3种蛋白分布在细胞的不同部位。重组痘苗病毒的成功构建为更好地研究gp340 / 2 2