鹅细小病毒、鹅副粘病毒双重PCR检测方法的建立

摘要

目的建立用于鹅细小病毒(GPV)和鹅副粘病毒(GPMV)快速鉴别的双重PCR检测方法。方法根据2种病原体的基因保守序列,分别设计与GPV的VP3和GPMV的F基因互补的2对引物,对混合样品中GPV的DNA及GPMV反转录后的cDNA模板进行双重PCR扩增。应用该方法对黑龙江省9市(县)GPV、GPMV病毒病的疑似病料进行检测。结果对cDNA模板进行双重PCR扩增得到与试验设计相符的574bp(GPV)和884bp(GPMV)2条特异性扩增带。双重PCR可以检测到1.32ng/L的GPMV和298ng/L的GPV核酸模板,DPV扩增结果为阴性。检测7个市(县)的发病鹅群均为鹅GPV感染,未检出GPMV。结论双重PCR方法是一种快速、敏感、特异的检测方法,可用于家禽GPV和GPMV感染。