抑制人高迁移率族蛋白1基因表达对胰腺癌细胞凋亡影响的研究

摘要

目的:探讨反义人高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因转染对人胰腺癌细胞的凋亡诱导作用及对Bcl-2/baxmRNA表达水平的影响。方法:应用分子克隆技术构建反义HMGB1基因真核表达载体pcDNA3.1/anti-HMGB1,脂质体介导转染人胰腺癌细胞panc1,G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR方法检测HMGB1、Bcl-2和Bax表达水平,MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡及细胞周期情况。结果:成功构建pcDNA3.1/anti-HMGB1真核表达载体,转染pcDNA3.1/anti-HMGB1可使panc1细胞HMGB1和Bcl-2mRNA表达水平显著降低,P0.05;与对照组相比,Bax/Bcl-2mRNA的比值显著升高,P<0.05。肿瘤细胞增殖能力明显受到抑制,P<0.01;并出现G1期阻滞和凋亡细胞百分率增加。结论:反义HMGB1基因转染能抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,是胰腺癌基因治疗的策略之一。