岩豆凝集素分子修饰与圆二色性的关系研究

摘要

天然态岩豆凝集素（ＭＤＬ）远紫外圆二色性（ＣＤ）谱显示２１６ｎｍ处单一负峰，是一种高β－折叠构象凝集素；近紫外ＣＤ谱呈现２８２ｎｍ处负峰和２６０～２７５ｎｍ及２９５ｎｍ处的负肩，经Ｎ－乙基顺丁烯二酰亚胺（ＮＥＭＩ）和对氯汞苯甲酸（ＰＣＭＢ）修饰ＭＤＬ的巯基，其近紫外ＣＤ谱未发生变化，远紫外ＣＤ谱仅发生细微变化，ＭＤＬ凝集活性保持不变；ＰＣＭＢ过量时，ＣＤ谱呈现典型的无规卷曲谱形，ＭＤＬ完全丧失凝集活性，去除ＰＣＭＢ后，活性又全部恢复．二硫苏糖醇（ＤＤＴ）修饰ＭＤＬ的二硫键并用碘乙酸（ＩＣＨ２ＣＯＯＨ）保护巯基，ＭＤＬ远紫外ＣＤ谱２１６ｎｍ处的负峰红移至２２５ｎｍ，且显著减小；同时，近紫外ＣＤ谱２８２ｎｍ处负峰几乎消失，两负肩分别保持完整，分子中α－螺旋降低，无规卷曲增加较多，ＭＤＬ凝集活性未发生变化．用Ｎ－溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）修饰ＭＤＬ分子中的色氨酸，导致２１６ｎｍ负峰蓝移至２０８ｎｍ且变小，分子中无规卷曲和α－螺旋增加，β折叠减少，近紫外ＣＤ谱２９５ｎｍ负肩消失，２８２ｎｍ负峰红移至２８７ｎｍ，ＭＤＬ凝集活性完全丧失．