用HPLC法测定人血浆中两种10-羟喜树碱含量

摘要

目的：建立同时测定人血浆中羟喜树碱（HCPT）两种活性成分羧酸型羟喜树碱（C～HCPT）和内酯型羟喜树碱（L-HCPT）含量的HPLC法，并且考察HCPT的稳定性。方法：采用HPLC-荧光法，检测器激发波长为363nm，发射波长为530nm。色谱柱为Lichrospher C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-0．075mol／L乙酸铵缓冲液（32：68，pH6．4），流速1．0mL／min，内标法计算药物浓度。结果：人血浆样品中C-HCPT和L-HCPT峰分离良好，最低检测浓度均为5ng／mL。L-HCPT在16．99～2175．00ng／mL，C-HCPT在14．94～1912．50ng／mL浓度范围内线性关系良好。C—HCPT和L～HCPT的相对回收率分别为96．79％～119．64％和100．23％～112．93％，日内和日间RSD均〈10％。经1mol／L盐酸溶液处理后，93．34％～97．18％的C—HCPT转化为L-HCPT。样品于-20℃保存28d基本稳定。结论：本方法专属性强，灵敏、可靠，适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的监测和体内药动学研究。