手性衍生-高效液相色谱法拆分菌体细胞壁中α,ε-二氨基庚二酸非对映异构体

摘要

建立了一种手性衍生-高效液相色谱荧光检测法拆分菌体细胞壁中α,ε-二氨基庚二酸(DAP)3种非对映异构体(LL、DD和meso)的方法。100mg干细胞样品经2mL6mol/LHCl于110℃下水解8h,水解液用Na2CO3调pH至中性。水解后的样品经邻苯二甲醛(OPA)和N-乙酰基-L-半胱氨酸手性衍生后,使用乙腈与0.05mol/L的磷酸盐缓冲液(10:90,V:V)混合溶剂洗脱,反相C18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,荧光检测器检测(ex=350nm,em=455nm)。α,ε-二氨基庚二酸(DAP)3种非对映异构体(LL、DD和meso)的手性衍生物得到良好分离。对7个样品分析结果表明,适用于菌体细胞壁中DAP的3种非对映异构体的分离。