3个不同品系小鼠ES细胞的绿色荧光蛋白标记(英文)

摘要

用电穿孔法将线性化的质粒pEGFP N3分别导入来自 12 9/ter、C5 7BL/ 6J和BALB/c 3个品系的小鼠胚胎干细胞MESPU 13、MESPU 35和MESPU 6 2中 ,经G4 18筛选、荧光显微镜镜检、阳性克隆扩增、流式细胞仪分选、再扩增以及核型分析等过程 ,分别得到核型大于 85 %的被EGFP稳定标记的细胞株 5个 (12 9/ter 2个、C5 7BL/ 6J 1个、BALB/c 2个 ) ,分别命名为MESPU 13/G1和MESPU 13/G2、MESPU 35 /G1、MESPU 6 2 /G1和MESPU 6 2 /G2。从不同品系中各选一个增殖生长快、形态典型的标记细胞株 ,进行碱性磷酸酶染色、oct4基因产物的表达检测、类胚形成和体内分化鉴定 ,结果表明所得到的核型正常的、稳定标记的ES细胞系具有原ES细胞的典型特征。