PCR-RFLP技术用于鉴别赫坎按蚊复合体近缘种按蚊的研究

摘要

目的　区别赫坎按蚊种团内近缘种。方法　应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性方法 (PCR- RFL P)技术 ,对辽宁省现场捕获的按蚊用特异性 ITS2 引物进行 PCR扩增 ,限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 消化 ,琼脂糖凝胶电泳分析。结果　中华按蚊的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Rsa 酶切成 35 0 bp和 2 0 0 bp两条酶切 DNA条带 ;嗜人按蚊核糖体 DNA (r DNA)的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Hinf 酶切成 4 10 bp的酶切 DNA条带 ;雷氏按蚊的 ITS2 基因 PCR扩增产物能分别被限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 酶切 ,分别显示 35 0 bp和 4 0 0 bp的酶切 DNA条带 ;八代按蚊的 PCR扩增产物没有显示明显的限制性内切酶 Rsa 或 Hinf 酶切条带。结论　依据r DNA的 ITS2 区段基因特征建立的 PCR- RFL P技术可用于鉴别赫坎按蚊种团的中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊