木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体制备方法的研究

摘要

目的　探讨了木瓜凝乳蛋白酶高效价抗体的制备方法。方法　将纯化的木瓜凝乳蛋白酶 (电泳纯 )以三种不同抗原形式———未处理原酶、H2 O2 抑活的木瓜凝乳蛋白酶、碘乙酸抑活的木瓜凝乳蛋白酶分别免疫雄性白兔 ,免疫方法采用多次皮下注射和静脉冲击免疫相结合方式进行。从第三次免疫开始 ,每次免疫后均由耳静脉采血 ,用Westernblotting法和ELISA法检测抗血清 ,用SAS软件包对数据进行分析比较。结果　两种抑活抗原诱导产生的抗血清效价显著高于未抑活抗原 (P <0 0 5 ) ,而两种抑活抗原之间无显著性差异 ;静脉冲击免疫可显著提高机体免疫应答能力 ,急剧提升抗血清效价。结论　抑活抗原比未处理原酶具有更好的免疫原性。与碘乙酸相比 ,选用H2 O2 抑活抗原来制备抗体不失为一种经济有效的方法。抑活抗原采用皮下注射及静脉冲击免疫相结合的方式 ,可十分有效的产生及提高抗血清效价 。