^(125)碘标记三链形成寡核苷酸对肝癌细胞中病毒复制和细胞生长的抑制作用

摘要

目的探讨125碘(I)标记三链形成寡核苷酸(TFO)与乙型肝炎病毒(HBV)DNA的特异性结合能力及其对肝癌细胞HepG2.2.15中病毒复制及细胞生长的抑制作用。方法合成能与HBV前S基因特异结合的TFO,并以125I标记。将HepG2.2.15细胞分别与125I-TFO实验组(125I-TFO组)、等量TFO对照组(TFO组)、相同放射性活度的钠125碘(Na125I)组和空白对照组共同培养,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞培养液中HBVDNA拷贝量变化,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染后各组细胞的存活率。结果RT-PCR显示转染48h后,4组间病毒拷贝数量的差异有统计学意义(P<0.01),125I-TFO组对病毒复制的抑制作用显著强于空白对照组(P<0.01)、125I对照组(P<0.01)和TFO组(P<0.01);TFO组的抑制病毒复制作用显著强于空白对照组(P<0.05)。转染24、48、72h,125I-TFO组对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用显著高于其他3组(P值均<0.01),并随时间的增加125I-TFO对细胞生长的抑制作用呈线性上升趋势。结论125I-TFO可有效地抑制肝癌细胞中HBV的复制及肝癌细胞的生长,为今后制备抗HBV、抗HBV相关肝细胞癌的放射性基因治疗药物奠定了基础。