重组可溶性人CD137在CHO细胞中的表达

摘要

目的:获得表达人可溶性CD137抗原的dhfr-CHO细胞株。方法:将CD137-hIgG1Fc-pCD-NA3重组质粒及pSV2-dhfr质粒,运用脂质体介导法共转染CHO细胞。用G418筛选出阳性克隆,MTX递增浓度诱导人可溶性CD137在dhfr-CHO细胞的表达。运用RT-PCR检测CD137mRNA转录水平,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测人CD137可溶性蛋白在CHO细胞中的表达。结果:重组质粒转化细胞进行RT-PCR后,得到一大小为558bp的特异性条带,与人CD137胞膜外区一致;重组质粒转化细胞进行SDS-PAGE得到一大小约为37KDa的条带,与人CD137-hIgG1Fc融合蛋白大小基本一致。结论:获得了表达人可溶性CD137的dhfr-CHO细胞株,为获得纯化的CD137抗原、制备CD137单抗奠定了基础。