外源性肝再生增强因子重组质粒在大鼠肝组织中的表达研究

摘要

目的研究外源性肝再生增强因子(ALR)重组质粒在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的表达情况。方法猪血清腹腔注射制备免疫性肝纤维化大鼠模型,pcDNA3-ALR重组质粒静脉注射对其进行干预,通过免疫组化、Western bolting检测大鼠肝组织ALR蛋白质的表达情况,通过RT-PCR检测ALR mRNA的表达情况。结果所有组的大鼠肝组织均有ALR蛋白的表达,其中,以正常组表达最弱,ALR处理组表达最强。图像分析细胞染色密度,正常对照组与模型组的结果分别为(0.109±0.01)和(0.159±0.02),二者相比差异有显著性(P<0.01);ALR处理组为(0.198±0.04),与模型组相比差异也有显著性(P<0.01)。Western bloting测定肝组织ALR的表达的结果与免疫组化相似。ALR mRNA在各组大鼠肝组织的表达pcDNA3-ALR处理组在约550bp处出现了用特定引物扩增的特异基因条带,此条带与直接从大肠杆菌中制备的pcDNA3-ALR重组质粒的扩增条带相同。正常对照组和模型组未出现用特定引物扩增的条带。结论ALR在正常大鼠肝组织的表达较低,在免疫损伤后的肝组织的表达明显增强。ALR重组质粒可在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中发生表达,pcDNA3-ALR重组质粒处理组ALR蛋白表达明显增强是由于外源性ALR与内源性ALR表达“叠加”的结果。