分别针对猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1、TNF-α基因以及看家基因β-actin的序列设计了1对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测Fas、FasL、TNFR1、TNF-α及β-actin的SYBR GreenⅠreal-ti me PCR方法。该方法线性关系好(r2≥0.995),敏感性高,初始模板的检出下限除TNFR1为1×102copies/μL外,其他均为1×101copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%。应用所建立的方法对猪生殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血单个核细胞中Fas、FasL、TNFR1和TNF-αmRNA的表达水平进行了检测。结果表明,建立的real-ti me PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好。
展开▼
机译:插入染料SYBR Green I实时PCR方法在炭疽芽孢杆菌菌株质粒pXO1和pXO2以及特定染色体rpoB序列基因检测中的应用原始名称(非英语)Zastosowanie旋律实时PCR opartej na fluorescencji barwnika SYBR Green我做wykrywania genow zlokalizowanych w DNA plazmidow pXO1 i pXO2 oraz specyficznej sekwencji chromosomalnej rpoB szczepow炭疽杆菌[波兰语]