丹酚酸B体外诱导MSCs向心肌细胞分化中β-catenin表达的实验研究

摘要

[目的]体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化,检测分化过程中β-catenin蛋白表达的变化。[方法]大鼠MSCs经采用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养,免疫细胞化学法检测MSCs的表面抗原表达,取纯化稳定的P3代MSCs,将其分为4组:空白对照组、5-氮胞苷组、丹酚酸B组、5-氮胞苷联合丹酚酸B组、进行诱导,诱导4周,观察细胞形态学改变;免疫组化方法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达,逆转录———聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MSCs诱导前后糖原合成激酶(GSK)、β-catenin基因mRNA表达。[结果]诱导分化后的各组不同程度的阳性表达心肌细胞特异性蛋白心肌肌钙蛋白T(cTnT),RT-PCR显示诱导组GSK基因表达上调,β-catenin基因表达下调。[结论]丹酚酸B促进MSCs向心肌细胞分化,并伴有wnt经典信号通路的抑制。