人精子表面蛋白P34H的基因克隆及其在睾丸和附睾中表达分析

摘要

目的 :克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区 ,为进一步体外表达P34H蛋白做准备。　方法 :提取人附睾体部总RNA ,并以此为模板 ,进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段。应用T/A克隆策略 ,将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体 ,并通过双酶切和DNA测序进行鉴定。同时 ,以 β actin为内参照物 ,进行反转录PCR半定量分析 ,比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量。　结果 :成功地克隆了P34H基因。将P34H的cDNA序列登录GenBank ,登录号为AF5 15 6 2 5。反转录PCR半定量分析表明P34H主要在附睾体部表达。　结论