抗α毒素1D5单抗ScFv基因表达菌株生物学活性的研究

摘要

为研究抗α型魏氏梭菌α毒素ScFv蛋白的生物学功能,利用PCR技术克隆抗α毒素1D5单抗的ScFw基因,构建含SCFQ基因表达质粒pHOG-lD5的重组表达菌株XL1-BLUE(pHOG-lD5)。酶切鉴定和序列分析证实构建的PHOG-1D5重组表达质粒含有ScFw基因,且基因序列和阅读框架正确。ELISα检测结果表明在重组菌株XL1-BLUE(PHOG-1D5)培养上清和细胞周质中均检测到目的蛋白。SDS-PαGE分析表明目的蛋白表达量占菌体总蛋白相对含量的29.2%。同时对ScFv蛋白生物学活性进行检测,结果表明其能中和α毒素的卵磷脂酶活性且能够对致死性腹腔攻击α毒素的小鼠产生良好的被动保护作用,从而为临床治疗α毒素中毒奠定了坚实基础。