基于铕螯合物纳米粒子标记的时间分辨荧光免疫法检测嗜水气单胞菌

摘要

以铕螯合物荧光纳米粒子标记嗜水气单胞菌菌株B15兔抗IgG,得到纳米粒子-IgG复合物,建立了新的嗜水气单胞菌双抗夹心时间分辨荧光免疫检测(TRFIA)法。采用正交试验优化了兔抗IgG的包被时间和包被浓度,以及纳米粒子-IgG的免疫反应时间和稀释度。偶合了铕螯合物的纳米粒子发光强度大,光稳定性高,因此灵敏度被改善。方法的检测限为1.0×10^(3) CFU/mL,在1.0×10^(3)~5.0×10^(8) CFU/mL范围内线性关系良好(相关系数0.990),板内和板间变异系数分别为2.70%和9.62%。将该方法用于实际样品的检测,阳性检出率为100%。