N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱导的成骨细胞相关基因及蛋白表达影响的研究

摘要

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的成骨细胞相关基因及蛋白表达的影响,为临床运用N-乙酰半胱氨酸预防和治疗种植体周围炎导致的种植体松动和脱落提供理论基础。方法:采用体外培养小鼠成骨细胞系(MC3T3-E1),以不同浓度N-乙酰半胱氨酸及脂多糖刺激细胞,分别在作用(6h、24h、48h、72h)后用cck-8法检测不同浓度N-乙酰半胱氨酸及脂多糖对细胞增殖情况的影响;将MC3T3-E1细胞随机分为4组:空白对照组、LPS(10 mg/L LPS)组、NAC(1 mmol/L)组、NAC+LPS组(NAC预刺激30 min后,NAC与LPS共同作用),实时荧光定量PCR法及ELISA法分别检测MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、白介素6(IL-6)及核转录因子(NF-kB)基因及蛋白表达的情况。结果:随着NAC浓度的提高,MC3T3-E1的增殖率逐渐增加,在1mmol/L时,细胞的增殖达到最大,但随着NAC浓度的继续增加,MC3T3-E1细胞的增殖率反而降低,表明高浓度的NAC具有毒性作用。NAC能拮抗LPS对MC3T3-E1细胞ALP和BGPmRNA水平的下调作用,同时拮抗LPS对MC3T3-E1细胞ALP和BGP蛋白表达的抑制作用;NAC能够抑制LPS对MC3T3-E1细胞IL-6和NF-kB mRNA水平的上调作用,同时降低LPS诱导的MC3T3-E1细胞IL-6和NF-kB蛋白的表达水平。结论:NAC可促进LPS诱导的MC3T3-E1细胞ALP、BGP表达,同时NAC通过抑制NF-kB活性,从而抑制LPS诱导的MC3T3-E1细胞表达IL-6等炎症因子。